بسیار مهم است که بدانیم داده های تولید شده با وسترن بلات معمولاً نیمه کمی در نظر گرفته می شوند. این به این دلیل است که مقایسه نسبی سطح پروتئین را ارائه می دهد، اما اندازه گیری مطلق کمیت را ارائه نمی دهد..
آیا وسترن بلات کیفی است یا کمی؟
Western blot یک روش کمی قابل اعتماد است تنها در صورتی که خواص و یکپارچگی نمونه، اختصاصیت آنتی بادی به پروتئین هدف، و پروتکل های بارگذاری در نظر گرفته شود. با توجه دقیق به جزئیات، می توانید از اشتباهات رایج جلوگیری کنید و از تفسیر نادرست داده های وسترن بلات جلوگیری کنید.
چه نوع روشی وسترن بلات است؟
وسترن بلات روشی آزمایشگاهی است که برای شناسایی مولکول های پروتئین خاص از میان مخلوطی از پروتئین ها استفاده می شود. این مخلوط می‌تواند شامل تمام پروتئین‌های مرتبط با بافت یا نوع سلول خاص باشد.
آیا وسترن بلات می تواند کمیت کند؟
وسترن بلات با آنتی بادی های اختصاصی برای پروتئین هدف که به عنوان آنتی بادی های اولیه شناخته می شوند، شناسایی می شوند. … با این حال، استفاده از وسترن بلات برای ارائه کمیت دقیق پروتئین ها در نمونه ها، برای ارزیابی تغییرات در سطوح بیان پروتئین نیز ممکن است (2).
آیا وسترن بلات می تواند پروتئین ها را کمیت کند؟
بعد از لیز سلول ها، مهم است که غلظت پروتئین کل نمونه را تعیین کنید. کمیت دقیق نمونه به شما امکان بارگذاری آن را می دهدمقدار مناسب پروتئین در هر خط.
