داده های چگالی سنجی تولید شده برای وسترن بلات معمولاً برای مقایسه فراوانی پروتئین بین نمونه هااستفاده می شود. هنگامی که وسترن بلات با استفاده از فلورسانس مادون قرمز یا نورتابی شیمیایی و تحت شرایط مختلف SDS-PAGE شناسایی شد، داده‌های چگالی سنجی غیرخطی مشاهده شد.
آنالیز تراکم سنجی چیست؟
Densitometry اندازه گیری کمی چگالی نوری در مواد حساس به نور، مانند کاغذ عکاسی یا فیلم عکاسی، به دلیل قرار گرفتن در معرض نور است.
چگونه از چگالی سنجی در تصویر J استفاده می کنید؟
دانسیتومتری با استفاده از ImageJ
- روی مرکز مربع کلیک کنید و آن را به خط بعدی بکشید. …
- برای آخرین خط، این روش را تکرار کنید اما Ctrl و 3 را فشار دهید تا آخرین خط تنظیم شود. …
- از ابزار خط برای کشیدن خطوط برای حذف پس‌زمینه خط از محاسبات استفاده کنید. …
- برای دریافت گزارش به: Analyse→Gels→Label Peaks بروید.
نتایج وسترن بلات را چگونه تجزیه و تحلیل می کنید؟
ابزارهای کمی‌سازی خود را تأیید کنید . پس از تجزیه و تحلیل، کمیت نسبی باندهای هدف باید 2، 1.5، و 1 باشد. ابزارها و تنظیمات کمی متفاوت را امتحان کنید تا زمانی که بتوانید به طور قابل اعتماد نتایج صحیح را بازتولید کنید.
چگونه یک وسترن بلات را کمیت می کنید؟
مرحله 1: پس زمینه تفریق شده را تعیین کنیدتراکم پروتئین مورد نظر شما (PI) و کنترل نرمال کننده (NC). مرحله 2: NC را که دارای بالاترین مقدار چگالی است، شناسایی کنید. مرحله 3: تمام مقادیر NC را بر بالاترین مقدار چگالی NC تقسیم کنید تا یک مقدار نسبی NC بدست آورید.
