ظرف را در دمای معتدل اتاق به مدت 2-3 دقیقه انکوبه کنید. سلول های محکم چسبنده را می توان به سرعت در دمای 37 °C جدا کرد. سلول ها را زیر میکروسکوپ مشاهده کنید. سلول های جدا شده در زیر میکروسکوپ گرد و شکست پذیر به نظر می رسند.
اگر سلول ها را به مدت طولانی تریپسین کنید چه اتفاقی می افتد؟
جوجه کشی سلول هایی با غلظت بیش از حد تریپسین برای یک دوره زمانی بسیار طولانی به غشای سلولی آسیب می رساند و سلول ها را می کشد. اگر در مورد غلظت تریپسین مورد استفاده مطمئن نیستید، از غلظت کم استفاده کنید.
چگونه سلول ها را تریپسین می کنید؟
سلول ها را می توان با به آرامی پیپت کردن سوسپانسیون سلولی برای شکستن توده ها دوباره معلق کرد. در صورت نیاز می توان رقت بیشتری برای شمارش سلولی و/یا کشت فرعی انجام داد.
چقدر طول می کشد تا سلول ها متصل شوند؟
اولین سلول ها قبلاً بعد از 3-5 دقیقه متصل می شوند! در تجربه من، اکثر EC ها بعد از 10-20 دقیقه متصل شدند. اما هر چه بیشتر منتظر بمانید، پیوست محکم تر می شود.
آیا تریپسین کردن سلول ها دو روز متوالی بد است؟
بله، اگر سلول های خود را به طور مداوم پس از 24 ساعت تقسیم تریپسین می کنید، مضر است. توصیه می شود پس از 48 ساعت تقسیم شدن، تقسیم را انجام دهید. … شما می توانید سلول ها را تا زمانی که مورفولوژی خوب است حفظ کنید (بستگی به نوع سلول شما دارد، برخی از سلول ها می توانند تا 80 پاساژ و برخی تا 10 عبور کنند).
