در سالهای گذشته، کوریل از تمام سرمهای غیرفعال شده با حرارت برای کشتهای سلولی خود برای غیرفعال کردن پروتئین مکمل موجود در سرم نوزاد گوساله استفاده میکرد. از آنجایی که ما به سرم جنین گاوی تغییر کرده ایم، دریافتیم که غیرفعال سازی حرارتی لازم نیست برای بیشتر رده های سلولی.
چه مدت FBS غیرفعال را گرم می کنید؟
پروتکل زیر برای غیرفعال سازی حرارتی سرم جنین گاوی (FBS) پیشنهاد شده است. FBS به مدت 30±2 دقیقه در حمام آب همزن تا دمای 2±56 درجه سانتیگراد گرم می شود. غیرفعال سازی حرارتی (HI) - فرآیندی که در آن FBS در دمای 2±56 درجه به مدت 2±30 دقیقه حفظ می شود.
چرا غیرفعال کردن حرارت برای FBS قبل از استفاده ضروری است؟
یک درمان متداول FBS غیرفعال کردن حرارت است که در آن FBS در دمای 56 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه در یک حمام آب با تکان دادن گاه به گاه گرم می شود. هدف غیرفعال کردن اجزای سیستم مکمل است که در FBS [24] و دیگر مهارکنندههای ناشناخته بالقوه رشد سلولی وجود دارد.
چرا باید سرم غیرفعال را گرم کنید؟
هدف از غیرفعال سازی حرارتی از بین بردن فعالیت مکمل در سرم بدون تأثیر بر ویژگی های محرک رشد محصول است. حذف فعالیت کمپلمان از سرم برای اکثر کشت های سلولی لازم نیست، اما ممکن است برای کشت هایی که به فعالیت کمپلمان حساس هستند ضروری باشد.
چگونه FBS غیرفعال شده حرارتی را ذخیره می کنید؟
FBS ذوب شده و سایر سرم ها را با یخچال ایمن محافظت کنیدذخیره سازی. سرم ذوب شده را به سرعت استفاده کنید. FBS مایع و سایر سرم ها را می توان در یخچال (2 تا 8 درجه سانتیگراد) تا چهار هفته نگهداری کرد.